Оценка фагоцитарной активности и способности нейтрофилов к окислительному взрыву – дигидрородаминовый тест (Neutrophil Oxidative Burst, Dihydrorhodamine, DHR)

Подготовка к исследованию:

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Референсные значения:

• Фагоцитарная активность: 80 - 100%.
• Индекс окислительного взрыва: >18.

Повышение значений (положительный результат):

• Острый период инфекционно-воспалительных процессов, аутоиммунные заболевания, аллергия.

Понижение значений (отрицательный результат):

• Снижение фагоцитарной активности фиксируется при: хронизации инфекционного процесса, иммунодефицитных состояниях, иммуносупрессивной терапии, заболеваниях соединительной ткани, тяжелом поражении почек, тяжелых травмах, ожогах, злокачественных новообразованиях, ионизирующем облучении и заболеваниях, связанных с циркулирующими иммунными комплексами.
• Снижение индекса окислительного взрыва наблюдается при таких состояниях как: врожденные дефекты фагоцитов, хронические инфекции, СПИД, трансплантация органов и тканей.

Процесс фагоцитоза происходит с помощью полиморфноядерных нейтрофилов и моноцитов и является важным средством защиты организма от бактериальных и грибковых инфекций. Фагоцитарный процесс делится на несколько стадий: хемотаксис (миграция лейкоцитов в очаги воспаления), прикрепление частиц к клеточной поверхности фагоцитов, попадание частиц внутрь фагоцитов и внутриклеточное уничтожение с помощью кислородозависимых (окислительный взрыв) и кислородонезависимых механизмов. Активные формы кислорода активируют свободнорадикальные реакции, что приводит к разрушению мембран поглощенных бактериальных частиц. Состояние, при котором увеличивается поглощение фагоцитирующими клетками кислорода в период активации и увеличение активных форм кислорода называется окислительным (респираторным) взрывом.

Первичные иммунодефициты – это врожденные нарушения системы иммунитета, обусловленные генетическими дефектами одного или разных ее звеньев (клеточного и гуморального иммунитета, фагоцитоза, системы комплемента). Пациенты с первичными иммунодефицитами начально выявляются по клиническим проявлениям – истории повторяющихся инфекций. Характерные инфекционные агенты указывают на то, какая часть иммунной системы может быть нарушена.

Среди дефектов фагоцитоза такие варианты первичного иммунодефицита, как дефицит миелопероксидазы (МПО, MPO), хроническая гранулематозная болезнь, дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы связаны с нарушением способности к продукции и аккумуляции нейтрофилами реактивных форм кислорода (окислительному взрыву), что нарушает механизм уничтожения фагоцитированных патогенов. Вследствие этого наблюдается недостаточный контроль над инфекционным процессом.

Возможны также вторичные (приобретенные) изменения окислительного метаболизма нейтрофилов, в том числе вследствие дисрегуляции и дефицита ферментных систем при различных острых (например, сепсис и системный воспалительный ответ, ожоги) или хронических (например, диабет) патологических состояниях.

Дигидрородаминовый тест был разработан для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов посредством измерения окислительного взрыва после стимуляции нейтрофилов бактериями методом проточной цитометрии. Тест назначают с целью выявления нарушений в оксидативной (бактерицидной) функции нейтрофилов.

Для чего используется исследование:

• Для оценки состояния иммунной системы (как один из параметров).
• В целях диагностики иммунодефицитных состояний.
• Для подбора адекватной иммуномоделирующей терапии и контроля за её эффективностью.
• В составе комплексного исследования перед оперативными вмешательствами.

Когда назначается исследование:

• При рецидивирующих инфекциях.
• При инфекционных заболеваниях с хроническим и затяжным течением.
• При аутоиммунных и аллергических заболеваниях.
• При терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.
• При подозрении на генетически обусловленный или приобретенный иммунодефицит.
• При онкологических заболеваниях.
• При осложненном течении послеоперационного процесса.

Важные замечания:

• Отклонение показателей от референсных значений может быть нормальной реакцией организма на воздействие физиологических и патологических факторов, отражать чрезмерную активацию или истощение иммунной системы, характеризовать врожденный или приобретенный дефект звена иммунной системы.