Электрофорез гемоглобина (Hemoglobin Electrophoresis)

Подготовка к исследованию:

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Референсные значения: %

Гемоглобин HbA

• Дети в возрасте до 1 месяца: 5,9 - 77,2
• Дети в возрасте 1-3 месяца: 7,9 - 92,4
• Дети в возрасте 3-6 месяцев: 54,7 - 97,1
• Дети в возрасте 6-9 месяцев: 80,0 - 98,0
• Дети в возрасте 9-13 месяцев: 86,2 - 98,0
• Дети в возрасте 13-24 месяцев: 88,8 - 98,0
• Дети, старше 2 лет и взрослые: ≥ 96,50

Гемоглобин HbA2

• Дети в возрасте до 1 месяца: 0,0 - 2,1
• Дети в возрасте 1-3 месяца: 0,0 - 2,6
• Дети в возрасте 3-6 месяцев: 1,3 - 3,1
• Дети в возрасте 6-24 месяца: 2,0 - 3,3
• Дети, старше 2 лет и взрослые: ≤ 3,5

Гемоглобин HbF

• Дети в возрасте до 1 месяца: 22,8 - 92,0
• Дети в возрасте 1-3 месяца: 7,6 - 89,8
• Дети в возрасте 3-6 месяцев: 1,6 - 42,2
• Дети в возрасте 6-9 месяцев: 0,0 - 16,7
• Дети в возрасте 9-13 месяцев: 0,0 - 10,5
• Дети в возрасте 13-18 месяцев: 0,0 - 7,9
• Дети в возрасте 18-24 месяца: 0,0 - 6,3
• Дети, старше 2 лет и взрослые: ≤ 2,0

Повышение значений (положительный результат):

• Обнаружены патологические формы гемоглобина.

Понижение значений (отрицательный результат):

• Уровень HbA, HbA2, HbF соответствует возрастным нормам, патологические формы гемоглобина не выявлены.

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5% гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов) – 2α и 2β, – каждая из которых связана с гемом. HbA обеспечивает адекватный газообмен и тканевую оксигенацию. Фракция HbA2 - второстепенная форма гемоглобина, имеет формулу 2α2δ. Также у взрослого допустимо наличие следовых количеств фетального гемоглобина HbF (2α2γ), который является преобладающей фракцией в течение внутриутробного периода. В течение первых 6 месяцев жизни HbF замещается HbA.

Нарушения структуры гемоглобина обычно разделяют на две группы: гемоглобинопатии и талассемии, хотя талассемии являются формой гемоглобинопатии. Талассемии представляют собой нарушения синтеза α-, β- или обеих цепей гемоглобина. Также могут отмечаться нарушения синтеза δ-, γ- цепей. Большинство вариантов α- и β-талассемий сопровождается изменением уровня HbF и HbA₂, поэтому определение этих изоформ может быть использовано для скрининга этих состояний.

Остальные гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Наиболее распространённые и клинически значимые аномальные варианты гемоглобина: S, D, E, C. Варианты HbS и HbD  – патологические формы гемоглобина, которые обладают идентичной миграцией в щелочном геле и являются результатом точечных мутаций гена, кодирующего β-глобин. Варианты Е и С при данном методе мигрируют в составе фракции HbA₂, при их наличии фракция HbA2 достигает более 25%. Наибольшее клиническое значение представляет HbS-вариант, который приводит к серповидноклеточной анемии.

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Электрофорез является чувствительным методом, с помощью которого можно исключить гемоглобинопатии либо определить тактику дальнейшего обследования для установления точного диагноза заболевания. Метод характеризуется высокой внутрипостановочной (SD < 0,4; CV < 7,7) и межпозвоночной воспроизводимостью (SD < 0,6; CV < 9,9).

Метод исследования основан на электрофорезе гемоглобина, полученного при лизисе отмытых эритроцитов обследуемого. После разделения гемоглобина на фракции производится окрашивание зон миграции. Содержание гемоглобина в составе фракций измеряется с помощью цифровой денситометрии.

Когда назначается исследование:

• Скрининг гемоглобинопатий.
• Скрининг талассемий.
• Наличие семейного анамнеза врожденной патологии гемоглобина, серповидно-клеточной анемии.
• Уточнение причин микросфероцитоза, серповидной деформации эритроцитов, гемолитической анемии.
• Усталость, отсутствие энергии, бледность, желтушность, задержка роста у детей, приступы боли (серповидно-клеточная анемия).
• Внутриутробная гибель плода в анамнезе.

Важные замечания:

• Тест обладает высокой достоверностью при скрининге β-талассемий, вариантов, приводящих к серповидноклеточной анемии, и синдромов персистенции фетального гемоглобина.
• При использовании данного метода может быть затруднена идентификация α+-талассемии (талассемия с одной мутацией).